使用BOD五日生化测定仪时，样品稀释是保障检测有效性的关键操作，以下四类情况必须进行稀释处理，以确保培养后溶解氧消耗处于 40%-70% 的理想区间，避免检测结果失真或失败。

一、高浓度有机物水样需优先稀释

当水样来自高污染源头（如食品加工废水、酿酒废水），或目视观察有明显有机物腐败特征（如浑浊度高、散发酸臭味），这类水样 BOD 值通常超过 600mg/L，若直接检测，培养过程中溶解氧会被快速耗尽（2-3 天内降至 0mg/L），无法完成五日生化反应，导致结果偏低（仅反映部分有机物降解）。例如含大量蛋白质的屠宰废水，原水样 BOD 可达 3000-5000mg/L，需稀释 10-100 倍后，使稀释后水样 BOD 控制在 200-400mg/L，才能保证五日期间溶解氧持续供应。此外，即使外观清澈但含高可溶性有机物的水样（如酱油废水），也需通过稀释降低有机物负荷 —— 这类水样若直接检测，会因微生物快速繁殖消耗氧气，导致后期溶解氧不足，检测值仅为实际值的 60%-70%。

二、预实验显示溶解氧消耗超限时必须稀释

按标准方法进行 24 小时预实验后，若原水样溶解氧消耗率＞70%（即 24 小时内消耗的溶解氧占初始值的 70% 以上），说明水样中可降解有机物含量已超过当前溶解氧的承载能力。例如初始溶解氧为 9mg/L，24 小时后降至 2mg/L，消耗率约 78%，此类水样需立即稀释 —— 通过 1:10 稀释后，有机物浓度降至 1/10，溶解氧消耗速率减缓，可满足五日培养需求。若梯度预实验中（1:10、1:100 等稀释比例），低倍数稀释组（如 1:10）消耗率仍＞70%，需继续提高稀释倍数（如 1:100），直至某一稀释组消耗率落入 40%-70% 区间。

三、超过仪器检测量程的水样需强制稀释

BOD 测定仪的量程存在上限（常见 0-600mg/L、0-1000mg/L），若通过 COD 值推算或同类水样经验判断，水样 BOD 值超过仪器最大量程，必须稀释至量程范围内。例如仪器量程为 0-600mg/L 时，COD=2000mg/L 的工业废水（按 BOD=COD×0.5 估算，BOD 约 1000mg/L），需稀释 2 倍（1:2）使预计值降至 500mg/L；若 COD=5000mg/L，需稀释 10 倍（1:10）使预计值控制在 250mg/L 左右。稀释时需严格按比例操作，避免因稀释不足导致检测值 “爆表”（显示为量程最大值），或稀释过度增加误差。

四、溶解氧消耗异常的水样需针对性稀释

部分水样虽初始浓度判断不明确，但预实验显示溶解氧消耗存在异常：若培养 5 天后原水样溶解氧＜1mg/L（处于厌氧状态），说明有机物过多导致缺氧，微生物代谢受抑制，检测结果无法反映真实 BOD 值；若平行样测定时，原水样偏差＞20%（因局部缺氧导致降解不均），需通过稀释改善反应条件。此外，含抑制性物质的高浓度水样（如含少量重金属的工业废水），稀释可降低抑制物质浓度 —— 例如某化工废水原水样中重金属浓度较高，抑制微生物活性，稀释 10 倍后抑制作用减弱，微生物才能正常降解有机物，使检测结果更准确。

稀释操作需遵循对应规范：采用移液管精准量取，避免用量筒导致的体积误差；稀释水需提前曝气（溶解氧≥8mg/L）并加入营养盐，保证微生物代谢需求；稀释后轻轻摇匀（避免气泡产生），静置 10 分钟再测定初始溶解氧。若稀释后仍出现溶解氧消耗过快（如 1:100 稀释组 3 天内溶解氧＜2mg/L），需进一步提高稀释倍数，直至满足五日培养要求。通过针对性稀释，可使各类高浓度或异常水样的 BOD 检测成功率提升至 90% 以上，为水质评估提供可靠数据。