BOD五日生化测定仪通过模拟水体自然净化过程，测定水样中可生物降解有机物的含量，其检测结果的准确性高度依赖使用前的准备工作。需从仪器状态核查、试剂配制、样品预处理到环境控制全面落实，具体准备事项如下。

一、仪器基础状态检查是首要环节

需确认主机核心部件功能正常：打开电源后，检查显示屏是否清晰无乱码，按键响应是否灵敏（如 “温度设置”“搅拌” 等功能键）；查看培养箱温控系统，设定 20℃±1℃后，用温度计实地测量箱内温度（放置在样品放置层），30 分钟内温差需≤0.5℃，避免温度波动影响微生物活性。搅拌装置需试运行：将搅拌子放入蒸馏水中，开启搅拌功能，观察转速是否均匀（通常 60-100r/min），无卡顿或异响；若为压差式测定仪，需检查气压传感器是否灵敏，连接橡胶管有无破损漏气（可通过堵住进气口观察压力变化是否正常）。此外，需清洁培养瓶和密封盖：用去离子水冲洗后沥干，避免残留洗涤剂（会抑制微生物），瓶内壁若有划痕需更换（防止气体泄漏）。

二、试剂配制与活化需严格规范

稀释水是关键试剂，需用去离子水配制（电导率≤10μS/cm），并加入磷酸盐缓冲液（调节 pH 至 7.2±0.1）、硫酸镁、氯化钙等营养盐溶液（按标准比例添加，确保微生物代谢需求），配制后需曝气 2-4 小时（去除水中余氯），静置 12 小时以上。接种液需提前活化：选用生活污水处理厂曝气池污泥（或商品化接种液），按 1:10 比例加入稀释水，在 20℃下培养 24 小时，镜检确认微生物活性（如原生动物活跃），若接种液存放超过 48 小时，需重新活化。校准用葡萄糖 - 谷氨酸标准溶液需现配：准确称取 150mg 葡萄糖和 150mg 谷氨酸，用稀释水定容至 1000mL，配制后 4℃冷藏保存（不超过 24 小时），避免有机物分解影响校准精度。

三、样品预处理需保障代表性

水样采集后需在 2 小时内冷藏（4℃±2℃），运输过程避免剧烈震动（防止藻类繁殖）；测定前将水样恢复至 20℃（可在培养箱中放置 30 分钟），若水样温度与室温差异大，需缓慢升温（每小时温差≤5℃）。预处理需根据水样特性调整：高浓度水样（预计 BOD＞600mg/L）需稀释（用稀释水按 1:10、1:100 等梯度稀释），稀释倍数以培养后消耗溶解氧 40%-70% 为宜；含余氯的水样（如自来水）需加入硫代硫酸钠溶液还原（每 0.5mg 余氯加 1mL 10% 硫代硫酸钠），并静置 10 分钟；酸性或碱性水样需用稀硫酸或氢氧化钠调节 pH 至 6-8（用精密 pH 试纸检测），避免极端 pH 破坏微生物环境。

四、环境与辅助准备不可忽视

实验室需保持洁净无异味，远离挥发性化学品（如甲醛、酒精会抑制微生物）；操作台需水平稳固，放置培养箱的位置避免阳光直射（防止局部升温）。需准备专用记录工具：如样品登记表格（记录采样时间、稀释倍数、接种情况）、校准记录表（标准溶液浓度、空白值等）；备用耗材需齐全，如一次性移液管（避免交叉污染）、密封膜（增强培养瓶密封性）、废液桶（标注 “BOD 废液”，单独处理）。安全方面，需佩戴实验手套（接触污泥接种液时），提前准备消毒用品（如 75% 酒精，接触样品后消毒），若接种液溅到皮肤，需立即用肥皂水冲洗。

完成上述准备后，需进行预实验验证：用葡萄糖 - 谷氨酸标准溶液按常规步骤操作，培养前测定初始溶解氧，若空白样品（仅稀释水）的 BOD 值超过 2mg/L，需重新配制稀释水；标准溶液培养 5 天后的 BOD 值应在 180-230mg/L 范围内，偏差过大需检查接种液活性或稀释水质量。只有所有准备环节均符合要求，才能正式开始样品测定，为 BOD 检测结果的准确性奠定基础。